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TECNICAS DE BIOLOGIA

CELULAR Y MOLECULAR

 

            Hoy en día la investigación científica requiere el uso de diferentes técnicas que permiten llevar a cabo procesos de  manipulación de biomoléculas, ya sea para su purificación, síntesis o identificación. Estos procesos se entremezclan para llevar a su fin las investigaciones que se llevan adelante en los diferentes laboratorios. Esta oportunidad, revisaremos algunas técnicas para la purificación e identificación de proteínas además de otras técnicas de uso común en biología molecular.

          El primer paso de toda investigación es definir el modelo o fuente en que se va a realizar el trabajo, si el estudio va a ser realizado sobre una biomolécula es necesario definir la fuente de la cual la vamos a obtener.

          Las principales moléculas de investigación son las proteínas, que a través de sus diferentes funciones forman parte de la intrincada red metabólica de la célula.

          Los pasos a llevar adelante para la purificación de una proteína son los siguientes:

 

1.      Aislamiento De Proteínas

a.      Selección De La Fuente                        

b.     Métodos De Solubilización

c.      Estabilización

d.     Ensayos

e.     Estrategia De Purificación

2.     Solubilidades De Proteínas

a.      Efectos De La Concentración De Sales

b.     Solventes Orgánicos

c.      Efectos De pH

d.     Cristalización

3.     Separaciones Cromatográficas

a.      Intercambio Iónico

b.     Cromatografía En Papel

c.      Filtración En Gel

d.     Cromatografía De Afinidad

e.     Otras Cromatografías

4.     Electrofóresis

a.      En Papel

b.     Gel De Electroforesis

c.     Sds-Page

d.     Isoelectroenfoque

e.     Electroforesis Capilar

5.     Ultra centrifugación

a.      Sedimentación

b.     Ultra centrifugación Preparativa